NanoTag Biotechnologies 和 Synaptic Systems 介绍了第一个PSD95 FluoTag-X2 抗体，它在标准免疫染色应用方面例如免疫组织化学(IHC) (图1) 和免疫细胞化学(ICC) (图 2)展现出了稳固而可靠的结果。并且，在附加的抗原提取步骤中，它对经PFA / 福尔马林固定的，来源于大鼠和小鼠的组织和细胞没有任何的要求。
图1：用FluoTag-X2 抗-PSD95磺化Cy 3 抗体(cat. no. N3702-SC3-L,稀释比例1 : 500, 红色)，对自由浮动的经PFA固定的大鼠海马体的振动切片进行间接免疫染色。细胞核由DAPI染色可见为蓝色。
图2：用FluoTag-X2 抗-PSD95-ATTO 542 抗体(cat. no. N3702-At542-L, 红色)和FluoTag-X2 抗-GFAP-At488抗体 (cat. no. N3802-At488-L, 绿色)，对经PFA固定的大鼠海马体神经细胞和星形胶质细胞进行间接免疫染色。细胞核由DAPI染色可见为蓝色
突触后致密区 (PSD) 是位于突触后膜，并列于突触前活跃区的一个特殊蛋白致密区。起初，通过电子显微镜，他被鉴定为位于突触后膜上的电子致密结构(图3)。突触后致密区在突触间隙充当支架结构，使神经递质受体聚集在靠近突触前释放神经递质的位置(Banker et al., 1974; Ziff, 1997; Dosemeci et al., 2016)。
由于大脑区域，活跃状况，突触成熟和一些神经变性的疾病，突触后致密区的大小和成分也有所不同(Meyer et al., 2014; Vyas and Montgomery, 2016)
图3：大鼠海马结构突触的电子显微断层扫描图片
N. Holderith PhD 博士生
Laboratory of Cellular Neurophysiology,
Institute of Experimental Medicine
Budapest
图3：大鼠海马结构突触的电子显微断层扫描图片
N. Holderith PhD 博士生
Laboratory of Cellular Neurophysiology,
Institute of Experimental Medicine
Budapest
PSD95 (突触后致密区蛋白 95) 也称为SAP90 (突触关联蛋白 90)或者由DLG4基因编码的Disks large homolog 4 (Statthakis et al., 1997)。
与其邻近亲属PSD93, SAP102和SAP97，一同属于MAGUK 蛋白超级家族，并且共享PDZ, SH3和GUK结构域的特性(Woods and Bryant, 1993) (见图4)。
PSD95和PSD93 是PSD的关键组分(Hunt et al., 1996; Kennedy, 1997)，可以形成包含数百个拷贝的多聚体支架，聚集神经递质受体、离子通道和其他伴随的信号蛋白(Dosemeci et al., 2016)。
出于此原因， PSD95是一个重要的，常用的标记蛋白，用于神经系统中突触后端的特定免疫标记，包括免疫细胞化学 (ICC)和免疫组织化学(IHC)。然而，由于多聚体的，紧凑且致密的结构，抗体表位经常被巨大的完整IgG抗体分子所掩盖或由于空间位阻而难以接近。抗原修复方法或者特殊调整过的固定实验方案可以改善结果，但由于附加的组织处理步骤，对于其它抗体在多路复用实验中的应用可能会是一个限制。
新的PSD95 FluoTag N3702是一个单域抗体(sdAb)，通常被称为纳米抗体，由我们的合作伙伴公司NanoTag Biotechnologies所研制开发。这种重组骆驼源抗体仅由羊驼重链抗体的一个抗原结合位点组成。只有约仅仅15 kDa，这种FluoTag比传统的IgG抗体分子大约小10倍。由于非常小的尺寸，即使在标准的4% PFA灌注固定和后固定组织中，这种PSD95 FluoTag也可以稳定地访问其表位。这种组织制备方法由于确保了组织形态的极佳保存，并与大量可用的研究抗体兼容，所以通常用于振动和冷冻切片的免疫组化染色。
此外，在对人工培养神经元细胞的免疫组化染色中发现，新引入的PSD95 FluoTag在经PFA固定的细胞上表现卓越(图 2)。
它的单价结合特性，即每个FluoTag与确定数量的荧光团分子结合，使其成为定量分析的理想试剂。
为了确保最大范围的应用符合您的需求，我们新的PSD95 FluoTag可与一个广泛的荧光分子团共轭(见下表)
| Cat. No. | Product Description | Application | Quantity | Price | Cart |
|---|
| N3702-AF568-L | PSD95 sdAb, camelid, monoclonal, FluoTag-X2FluoTag-X2, AZdye 568 | WB ICC IHC | 200 µl | US$515.00 |   |
| N3702-AF647-L | PSD95 sdAb, camelid, monoclonal, FluoTag-X2FluoTag-X2, Alexa 647 | ICC IHC IHC-P | 200 µl | US$515.00 | |
| N3702-At488-L | PSD95 sdAb, camelid, monoclonal, FluoTag-X2FluoTag-X2, ATTO 488 | ICC IHC IHC-P | 200 µl | US$515.00 | |
Banker et al. 1974: Proteins of the postsynaptic density. PMID: 4419608
Dosemeci et al. 2016: The Postsynaptic Density: There Is More than Meets the Eye. PMID: 27594834
Hunt et al. 1996: PSD-95 is associated with the postsynaptic density and not with the presynaptic membrane at forebrain synapses. PMID: 8778289
Kennedy 1997: The postsynaptic density at glutamatergic synapses. PMID: 9185308
Meyer et al. 2014: Balance and stability of synaptic structures during synaptic plasticity. PMID: 24742464
Statthakis et al. 1997: Human postsynaptic density-95 (PSD95): location of the gene (DLG4) and possible function in nonneural as well as in neural tissues. PMID: 9286702
Vyas and Montgomery 2016: The role of postsynaptic density in neural degeneration and regeneration. PMID: 27482211
Woods and Bryant 1993: ZO-1, DlgA and PSD-95/SAP90: homologous proteins in tight, septate and synaptic cell junctions. PMID: 8155583
Ziff 1997: Enlightening the postsynaptic density. PMID: 9427241
